魯米諾(Luminol),又名發(fā)光氨。化學(xué)名稱為3-氨基-苯二甲酰肼。常溫下是一種蒼黃色粉末,是一種比較穩(wěn)定的人工合成的有機(jī)化合物。魯米諾是一種強(qiáng)酸,對(duì)眼睛、皮膚、呼吸道有一定刺激作用。魯米諾屬于化學(xué)發(fā)光試劑,在過氧化氫分子存在的條件下可以轉(zhuǎn)變成激發(fā)態(tài)氨基鄰苯二甲酸,繼而發(fā)出較強(qiáng)的熒光。
在通常情況下魯米諾與過氧化氫的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)相當(dāng)緩慢,但當(dāng)有某催化劑存在時(shí),反應(yīng)非常迅速。常用的催化劑是金屬離子,在很寬濃度范圍內(nèi),金屬離子濃度與發(fā)光強(qiáng)度成正比,從而可對(duì)某些金屬離子的化學(xué)發(fā)光分析,利用這一反應(yīng)可以分析那些含有金屬離子的有機(jī)化合物,達(dá)到很高的靈敏度。
其次是利用某些化合物對(duì)魯米諾對(duì)化學(xué)發(fā)光的增強(qiáng)和抑制作用來進(jìn)行測(cè)定,魯米諾試劑開始的應(yīng)用是用來檢測(cè)蛋白質(zhì)的。在蛋白印跡法(western blot)中,經(jīng)常會(huì)用到連接了酶的抗體來結(jié)合待檢測(cè)的蛋白質(zhì),而魯米諾化學(xué)發(fā)光試劑與酶(過氧化物酶)配合使用可以讓局部發(fā)光,把蛋白質(zhì)的位置顯示出來。圖中的發(fā)光非常明亮,應(yīng)該是因?yàn)樵噭├锛恿嘶瘜W(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑。當(dāng)然實(shí)際檢測(cè)蛋白質(zhì)的時(shí)候發(fā)光遠(yuǎn)沒有這么亮。
另外將魯米諾的衍生物如異魯米諾 (ABEI) 標(biāo)記到羧酸和氨類化合物上,經(jīng)過液相色譜 (HPLC) 或液相色譜 (LC) 分離后,再在堿性條件下與過氧化氫-鐵氰化鉀反應(yīng)進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè),如將新合成的化學(xué)發(fā)光試劑異硫氰酸異魯米諾標(biāo)記到酵母 RNA 后,通過離心和透析分離,然后進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。
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