酸洗液一般是由無(wú)機(jī)酸加上定量的緩鉵劑,抑制劑或者表面活性劑等涂加劑制成的,它們的性能和處理效果不僅取決地其中起主導(dǎo)作用的酸種類(lèi)和性能,而且還取決于這種酸與其中添加劑的成份及其在水中的含量和之間的配比。酸洗原理中重要的一點(diǎn)是酸與鐵作用時(shí)產(chǎn)生氫氣,使金屬基體表面的氧化皮機(jī)械的剝落,氫氣既有使基體表面氧化皮剝落的正面作用,同時(shí)過(guò)量的氫氣又有腐鉵金屬的品格,導(dǎo)致金屬表面充氫,使金屬變脆的負(fù)面影響,為了減輕“氫脆“對(duì)基體的損傷,在酸中加入合適的緩鉵劑,緩鉵劑能在金屬基體表面形成一層分子膜,以阻礙酸的進(jìn)一步作用,從而達(dá)到緩蝕的目的,抑制劑則有抑制氫氣的撣發(fā)比而起到減輕酸霧揮發(fā)的作用,在酸液中加入一定量的表面活性劑,可使洗液具有除油除銹的雙重作用。
電泳(Electrophoresis)是指帶電荷的粒子或分子在電場(chǎng)中移動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳。大分子的蛋白質(zhì),多肽,病毒粒子,甚至細(xì)胞或小分子的氨基酸,核苷等在電場(chǎng)中都可作定向泳動(dòng).1937年Tiselius成功地研制了界面電泳儀進(jìn)行血清蛋白電泳,它是在一U型管的自由溶液中進(jìn)行的,電泳后用光學(xué)系統(tǒng)使各種蛋白所形成折光率差別成為曲線圖象,將血清蛋白分為白蛋白,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白和γ-球蛋白五種,隨后,Wielamd 和Kanig 等于1948年采用濾紙條做載體,成功地進(jìn)行了紙上電泳。從那時(shí)起,電泳技術(shù)逐漸被人們所接受并予以重視,繼而發(fā)展以濾紙,各種纖維素粉,淀粉凝膠,瓊脂和瓊脂糖凝膠,醋酸纖維素薄膜,聚丙烯酰胺凝膠等為載體,結(jié)合增染試劑如銀氨染色,考馬斯亮藍(lán)等大大提高和促進(jìn)生物樣品著色與分辨能力,此外電泳分離和免疫反應(yīng)相結(jié)合,使分辨率不斷朝著微量和超微量(1ng~0.001ng)水平發(fā)展,從而使電泳技術(shù)獲得迅速推廣和應(yīng)用。在此主要介紹常用電泳的一般原理及其應(yīng)用。
電場(chǎng)強(qiáng)度(電勢(shì)梯度Electric field intensity)是指每厘米的電位降(電位差或電位梯度).電場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)電泳速度起著正比作用,電場(chǎng)強(qiáng)度越高,帶電顆粒移動(dòng)速度越快。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要,電泳可分為兩種:一種是高壓電泳,所用電壓在500~1000V或更高.由于電壓高,電泳時(shí)間短(有的樣品需數(shù)分鐘),適用于低分子化合物的分離,如氨基酸,無(wú)機(jī)離子,包括部分聚焦電泳分離及序列電泳的分離等。因電壓高,產(chǎn)熱量大,必須裝有冷卻裝置,否則熱量可引起蛋白質(zhì)等物質(zhì)的變性而不能分離,還因發(fā)熱引起緩沖液中水分蒸發(fā)過(guò)多,使支持物(濾紙,薄膜或凝膠等)上離子強(qiáng)度增加,以及引起虹吸現(xiàn)象(電泳槽內(nèi)液被吸到支持物上)等,都會(huì)影響物質(zhì)的分離.另一種為常壓電泳,產(chǎn)熱量小,室溫在10~25℃分離蛋白質(zhì)標(biāo)本是不被破壞的,無(wú)需冷卻裝置,一般分離時(shí)間長(zhǎng)。
在電場(chǎng)中液體對(duì)于一個(gè)固體的固定相相對(duì)移動(dòng)稱(chēng)為電滲.在有載體的電泳中,影響電泳移動(dòng)的一個(gè)重要因素是電滲。常遇到的情況是γ-球蛋白,由原點(diǎn)向負(fù)極移動(dòng),這就是電滲作用所引起的倒移現(xiàn)象.產(chǎn)生電滲現(xiàn)象的原因是載體中常含有可電離的基團(tuán),如濾紙中含有羥基而帶負(fù)電荷,與濾紙相接觸的水溶液帶正電荷,液體便向負(fù)極移動(dòng)。由于電滲現(xiàn)象往往與電泳同時(shí)存在,所以帶電粒子的移動(dòng)距離也受電滲影響;如電泳方向與電滲相反,則實(shí)際電泳的距離等于電泳距離加上電滲的距離.瓊脂中含有瓊脂果膠,,其中含有較多的硫酸根,所以在瓊脂電泳時(shí)電滲現(xiàn)象很明顯,許多球蛋白均向負(fù)極移動(dòng)。除去了瓊脂果膠后的瓊脂糖用作凝膠電泳時(shí),電滲大為減弱.電滲所造成的移動(dòng)距離可用不帶電的有色染料或有色葡聚糖點(diǎn)在支持物的中心,以觀察電滲的方向和距離。