實(shí)驗(yàn)步驟：

A. 配制37℃ K-H液（1.25 CaCl2，130 NaCl，5.4 KCl，11 葡萄糖，0.5 MgCl2，0.5 NaH2PO4及25 NaHCO3），向K-H液中通入95％O2-5% CO2氣體，緩沖液PH 值為7.4，并取部分K-H液放入冰箱中，使其溫度降到4℃。

B. 清潔Langendorff管路，每次使用前先用1000ml蒸餾水沖洗，打開水浴循環(huán)，再用K-H液將整個(gè)管路系統(tǒng)進(jìn)行沖洗。

C. 魯米鈉腹腔注射麻醉動(dòng)物（100mg/kg），并向肝靜脈注射100IU肝素，頸動(dòng)脈放血處死動(dòng)物，同時(shí)快速分離心臟，放入4℃K-H液中擠凈血液并稱重。

D. 將心臟迅速固定在Langendorff 灌流系統(tǒng)中，通過主動(dòng)脈以85cmH2O壓力逆行灌注，通過肺靜脈插入導(dǎo)管至左心房。

E. 心臟復(fù)跳后，將一個(gè)球囊插入心臟左心室，球囊和壓力換能器相連，在電腦上記錄左室內(nèi)壓，調(diào)整左室舒張內(nèi)壓（LVEDP）在4～10mmHg之間。待心臟左室收縮壓（LVESP）穩(wěn)定后且大于80mmHg，心率大于200次/分，可繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，并記錄心電圖（ECG）、主動(dòng)脈流量（AF）、冠脈流量（CF）、左室收縮末壓（LVESP）等指標(biāo)。

F. 缺血再灌注方案：關(guān)閉灌流液，停灌心臟45min后，打開灌流液進(jìn)行復(fù)灌90min（復(fù)灌起始15min通過肺靜脈給予一定的壓力輔助），同時(shí)記錄相關(guān)指標(biāo)。

G. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用蒸餾水沖洗整個(gè)管路系統(tǒng)，防止K-H液殘留在管路中。