取本品細(xì)粉1g,加水10ml,加熱回流3小時,濾過,濾液濃縮至約2ml,加入4倍量的乙醇,放置1小時,離心,沉淀用乙醇少量洗滌2次,揮干乙醇,加入硫酸溶液(1mol/L)3ml使沉淀溶解,置水浴中水解4小時,用碳酸鋇細(xì)粉調(diào)節(jié)pH至6.5~7,離心,取上清液蒸干,殘渣加入稀乙醇溶液1ml溶解,作為供試品溶液。另取葡萄糖、木糖對照品分別用稀乙醇配制成每1ml含1mg的溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄Ⅵ B)試驗,分別吸上述3種溶液各5μl點于同一硅膠G薄層板上,以醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-水(20:20:2:5)為展開劑,單向展開3次,展距為8cm,10om,12cm,取出,揮去溶劑,噴以鄰苯二甲酸-苯胺試劑,105℃加熱15分鐘,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。
抗腫瘤作用:用槐耳清膏進(jìn)行荷瘤動物體內(nèi)抑瘤試驗,證實在一定劑量范圍內(nèi)槐耳清膏灌胃對小鼠肉瘤S180。抑瘤率25%-46%,腹水型S180生命延長率38%。多糖腹腔給藥抑瘤率37.1%-48%,生命延長率50%。均質(zhì)多糖蛋白(PS-T)灌胃抑瘤率38%。腹腔給藥為38%-40.1%(P槐耳野生資源稀缺,人工培育困難,生長周期長,生物效應(yīng)低。用固體發(fā)酵法生產(chǎn)槐耳菌質(zhì),液體培養(yǎng)法生產(chǎn)菌絲體。
固體發(fā)酵菌絲體生長溫度5℃,溫度37℃,適pH5.5。
液體培養(yǎng)培養(yǎng)基:玉米粉2%,豆餅粉2%,pH5左右。溫度:27-28℃。
種齡:96h。
接種量:10%-15%。培養(yǎng)時間:6-7d。在上述適宜培養(yǎng)條件下,液體培養(yǎng)槐栓菌的菌絲干重基本穩(wěn)定在2g/100ml
毒性動物急性毒性試驗表明,清膏對小鼠的給藥劑量相當(dāng)于人臨床劑量的126.6倍;大鼠按95倍灌胃,均未能測出LD50,長期毒性試驗,大鼠按臨床劑量的95倍灌胃3個月,家犬小劑量組為臨床等效劑量,大劑量組為其24.7倍,連續(xù)灌胃6個月,動物生長正常,經(jīng)血象、生化等檢查分析,各組動物都未發(fā)生異常,也未發(fā)現(xiàn)由引起的病理性改變。特殊毒理如小鼠微核及染色體畸變試驗等均為陰性反應(yīng)