取本品4g,加水40ml,振搖,放置2小時(shí),濾過,濾液照下述方法試驗(yàn):①取濾液1ml,加10%α-萘酚乙醇溶液2~3滴,混勻,沿管壁緩緩加入硫酸1ml,靜置分層,兩液面交界處呈紫紅色環(huán);②取濾液1ml,加0.2%茚三酮試液數(shù)滴,加熱5分鐘,即顯藍(lán)紫色。
取本品細(xì)粉1g,加水10ml,加熱回流3小時(shí),濾過,濾液濃縮至約2ml,加入4倍量的乙醇,放置1小時(shí),離心,沉淀用乙醇少量洗滌2次,揮干乙醇,加入硫酸溶液(1mol/L)3ml使沉淀溶解,置水浴中水解4小時(shí),用碳酸鋇細(xì)粉調(diào)節(jié)pH至6.5~7,離心,取上清液蒸干,殘?jiān)尤胂∫掖既芤?ml溶解,作為供試品溶液。另取葡萄糖、木糖對(duì)照品分別用稀乙醇配制成每1ml含1mg的溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄Ⅵ B)試驗(yàn),分別吸上述3種溶液各5μl點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-水(20:20:2:5)為展開劑,單向展開3次,展距為8cm,10om,12cm,取出,揮去溶劑,噴以鄰苯二甲酸-苯胺試劑,105℃加熱15分鐘,供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。
主成分為槐耳蛋白多糖,其水解產(chǎn)物含L-巖藻糖(fucose),L-阿拉伯糖(arabinose),D-木糖(xylose),D-甘露糖(mannose),D-半乳糖(galactose),D-葡萄糖(glucose)等6種單糖,及天冬氨酸(aspartic acid),蘇氨酸(threonine),絲氨酸(serine),谷氨酸(glutamicacid),脯氨酸(proline),甘氨酸(glycine),丙氨酸(alanine),胱氨酸(cystine),纈氨酸(valine),蛋氨酸(methionine),異亮氨酸(isoleucine),亮氨酸(leucine),酪氨酸(tyrosine),苯丙氨酸(phenylalanine),賴氨酸(lysine),組氨酸(histidine),色氨酸(Typtophane),精氨酸(arginine)等18種氨基酸組成。
毒性動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)表明,清膏對(duì)小鼠的給藥劑量相當(dāng)于人臨床劑量的126.6倍;大鼠按95倍灌胃,均未能測(cè)出LD50,長(zhǎng)期毒性試驗(yàn),大鼠按臨床劑量的95倍灌胃3個(gè)月,家犬小劑量組為臨床等效劑量,大劑量組為其24.7倍,連續(xù)灌胃6個(gè)月,動(dòng)物生長(zhǎng)正常,經(jīng)血象、生化等檢查分析,各組動(dòng)物都未發(fā)生異常,也未發(fā)現(xiàn)由引起的病理性改變。特殊毒理如小鼠微核及染色體畸變?cè)囼?yàn)等均為陰性反應(yīng)